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충남대학교 분자생물공학 실험실
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  • INTRODUCTION
  • Protein Engineering
  • INTRODUCTION

    Protein Engineering

    Protein Engineering


     무세포 단백질 합성 시스템은 여러 유전자를 한 번에 다종의 효소로 발현시키는데 특화되어 있습니다. 이렇게 발현된 다종의 효소들은 활성을 확인하는 일련의 과정을 거쳐 활성을 탐색하고 활성 개선을 손쉽게 확인할 수있게 됩니다.


     Gateway cloning 또는 PCR 증폭을 통해 확보된 효소 유전자군을 무세포 단백질 합성 시스템을 이용하여 단시간에 다량의 효소로 합성할 수 있습니다. 합성된 효소들은 활성을 측정하여 각 효소가 가지는 다양한 기질 특이성 연구 처리량을 극대화할 수 있으며 뿐만 아니라 색 검출 분석을 기반으로 효과적인 활성 탐색 기술을 도입하여 손쉽게 활성을 측정합니다.


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    [ CFPS and colorimetric analysis ]
     


     PCR을 기반으로 한 saturational/combinatorial mutagenesis를 통해 유전자 돌연변이 라이브러리를 확보합니다. 확보한 유전자 라이브러리는 무세포 단백질 합성 시스템을 통해 빠르게 번역한 후 효소 활성 테스트를 통해 활성이 개선된 유전자를 확보합니다. 이와 같은 방법을 통해 항체 단백질의 성능을 개선하여 항원항체반응을 보다 용이하도록 합니다.


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    [ High throughout screening in CFPS ]